成果名称：酪氨酸磷酸化在乳腺癌耐药机制中作用的研究 项目单位 天津医科大学附属肿瘤医院 合作单位 项目负责人 张宁 所属技术领域 生物与医药 技术水平 国际先进 目前所处阶段 初期阶段 项目总规模或 评估价值（万元） 50.00 知识产权情况 发明专利 项目简介 多药耐药（MDR）和转移的发生是临床上肿瘤患者治疗失败和死亡的主要原因，以往把耐药和转移做为两种单独的生物学行为进行研究，多项研究表明肿瘤耐药和转移之间存在一种功能上的联系，对耐药和转移相关性的正确理解将会有助于更好的肿瘤治疗。本课题以人乳腺癌细胞系MCF-7和由阿霉素诱导的耐药株MCF-7/ADR为模型，分别提取两种细胞总蛋白，通过双向凝胶电泳分离，第一向采取固相pH梯度等电聚焦电泳，第二向采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，最后进行硝酸银和考马斯亮蓝染色。通过ImageMaster双向电泳图像分析软件对2DE图谱进行数字化分析匹配与对比，寻找差异表达蛋白质。应用生物信息学的方法，通过数据库搜索成功地鉴定了11种蛋白质。随后进一步对其中两种差异蛋白的功能进行了初步探讨。Western Blotting证实了Annexin a2在耐药细胞系MCF-7/ADR种表达明显增高。小RNA干扰技术降低Annexin a2在MCF-7/ADR中的表达，体外实验证实，Annexin a2降表达使细胞生长明显减慢，流式细胞仪对细胞周期分析发现Annexin a2降表达导致细胞发生G1其停滞，细胞增殖指数降低。同时侵袭实验证实Annexin a2降表达导致MCF-7/ADR细胞侵袭能力明显降低。本课题初步的分析了乳腺癌耐药细胞系MCF-7/ADR细胞和MCF-7细胞存在的差异表达蛋白质，分别涉及肿瘤转移、能量代谢、细胞增殖等。通过对差异蛋白Annexin a2功能进一步的探讨表明，在肿瘤的进展过程当中，肿瘤转移和耐药的发生可能不是单独发生的，两者之间可能存在一种功能上的相关性，在肿瘤细胞耐药相关基因激活导致发生耐药的同时也许伴随着转移相关信号传导通路的激活，从而导致转移相关基因的表达增高，促进了转移的发生。而Annexin a2有可能成为一个潜在的生物标记物和新的治疗靶标。